更新时间:2021-07-21
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试剂盒保温:
① ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么 ELISA 反应总是需要一定时间的温育。
② 温育常采用的温度有 43℃、37℃、室温和 4℃(冰箱温度)等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的合适温度。在建立 ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在 37℃经 1-2 小时,产物的生成可达ding峰。为加速反应,可提高反应的温度,有些试验在 43℃进行,但不宜采用更高的温度。抗原抗体反应 4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以形成多的沉淀。但因所需时间太长,在小鼠c-fosELISA检测试剂盒中一般不予采用。
elisa试剂盒保存条件:
1 ) 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20℃。
2 ) 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。
注意事项:
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡
2. 洗涤进程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性
3. 一次加样时刻控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样
4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,核算时请乘以稀释倍数
6. 在制造标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液制造,不能混杂
7. 底物请避光保存
8. 小鼠c-fosELISA检测试剂盒不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂
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