小鼠促红细胞生成素ELISA 检测试剂盒
本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆
试验原理:
EPO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知EPO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将EPO和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中EPO的浓度呈比例关系。
自备材料
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
小鼠促红细胞生成素ELISA 检测试剂盒
安全性
1. 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项
1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
小鼠促红细胞生成素ELISA 检测试剂盒
样品收集、处理及保存方法
1、 血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、 细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5、 保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到的结果。
小鼠促红细胞生成素ELISA 检测试剂盒
试剂盒性能
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的EPO标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的EPO含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-8.0IU/ml
4、敏感度: 0.01 IU/ml
小鼠促红细胞生成素ELISA 检测试剂盒
Allantoin 尿囊素 [97-59-6] 500g
Nigrosin B 油溶苯胺黑 [8005-02-5] 25g
Ninhydrin 茚三酮 [485-47-2] 25g
Nuclease Eliminator Wipes 去核酸酶擦拭布 / 25pk
1-Ally-2-thiourea 烯丙基硫脲 [109-57-9] 250g
Aloe-emodin 芦荟大黄素 [481-72-1] 1g
Aluminum powder 铝粉 [7429-90-5] 250g
Aluminum acetate, basic 碱式乙酸铝 [142-03-0] 250g
Aluminum ammonium sulfate, dodecahydrate 硫酸铵铝十二水 [7784-26-1] 250g
Aluminum chloride, anhydrous 无水三氯化铝 [7446-70-0] 250g
Aluminum chloride, hexahydrate 氯化铝 [7784-13-6] 250g
Aluminum distearate 碱式硬脂酸铝碱 [300-92-5] 250g
Aluminum stearate 硬脂酸铝 [637-12-7] 100g
Aluminum fluoride trihydrate 氟化铝三水 [15098-87-0] 100g
Aluminum hydroxide 氢氧化铝 [21645-51-2] 250g
Aluminum isopropoxide 异丙醇铝 [555-31-7] 100g
Aluminum nitrate, nonahydrate 硝酸铝九水 [7784-27-2] 250g
Aluminum oxide, active 酸性氧化铝 [1344-28-1] 500g
Aluminum oxide, active 中性氧化铝 [1344-28-1] 500g
Aluminon 玫红三羧酸铵 [569-58-4] 25g
Amaranth 苋菜红 [915-67-3] 10g
3-Aminoisonicotinic acid 3-氨基异烟酸 [2941-78-8] 50g
Aluminum oxide, active 碱性氧化铝 [1344-28-1] 500g
Aluminum potassium sulfate docecahydrate 硫酸铝钾十二水 [7784-24-9] 100g
Aluminum silicate 硅酸铝 [12141-46-7] 1kg
Aluminum sulfate, hexadecahydrate 硫酸铝十六水 [16828-11-8] 250g
Allantoin 尿囊素 [97-59-6] 50g
Amastatin 氨肽酶抑制剂 [100938-10-1] 1mg
Ambroxol hydrochloride 盐酸氨溴索 [18683-91-5] 1g
Amino-2-naphthol hydrochloride 1-氨基-2-萘酚盐酸盐 [1198-27-2] 25g
4-Amidinobenzamide hydrochloride 4-脒基苯甲酰胺盐酸盐 [59855-11-7] 5g
4-Amidinophenylmethanesulfonyl fluoride hydrochloride 4-(2-氨乙基)苯磺酰氟盐酸盐 [74938-88-8] 100mg
Amido black 10B 氨基黑10B [1064-48-8] 10g
Amido black 10B 氨基黑10B [1064-48-8] 50g
Amido Black Stain Solution , Ready-To-Use 5X Strength 氨基黑 10B溶液 / 100ml
Amikacin, hydrate 丁胺卡那霉素二水 / 1g
Amygdalin 苦杏仁苷 [29883-15-6] 1g
4-Bromoanisole 对溴苯甲醚 [104-92-7] 50g
4-Aminoacetophenone 4-氨基苯乙酮 [99-92-3] 50g
L-Amino acid oxidase >4 U/mg L-氨基酸氧化酶 [9000-89-9 2mg
L-Amino acid oxidase >4 U/mg L-氨基酸氧化酶 [9000-89-9 5mg