技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 上海通蔚生物细胞系的操作方法及注意事项
上海通蔚生物细胞系的操作方法及注意事项
发布时间:2022-11-16   点击次数:133次

细胞系通蔚生物积累了丰富的行业经营、管理经验,通以市场的力量和准则大力推动公司体系的全面变革,全面推进国际化为核心的新一轮创业,坚持我司的战略自信、能力自信和文化自信,坚定不移地走创新发展之路!


一、实验前准备

1、清理实验台及仪器

2、开启冷冻切片机并将冷冻切片机预降至所需温度(- 15~-20 ℃*)

3、准备好处理好的载玻片、刀片、胶水以及药品


二、取材

解剖之后迅速取出所需的新鲜组织,用干纱布或滤纸擦干后不需固定直接取材(24×24×2mm*),以防形成冰晶造成切片中形成形状不一的空泡,使细胞内结构移位。


注:取材中目的标本既要明确也要确保其结构的完整性,应避免不必要的脂肪及坏死组织附着;要尽量剔除毛发、硬骨或钙化物;保乳手术切缘由于脂肪组织较多,取材厚度最好不要超过 3mm,厚者冰冻费时,大者难以切完整。甲状腺及淋巴结组织要带全组织被膜并除去多余的脂肪组织。


三、冷冻切片

1、取出组织支承器,放平摆好组织,周边滴上包埋剂,速放于冷冻台上冰冻,细胞系用吸热器压住组织,至包埋剂与组织冻结成白色冰体即可切片(1~3分种)。

2、将冷冻好的组织块,夹紧于切片机持承器上,启动粗进退键,转动旋钮,将组织修平。

3、调好欲切的厚度,根据不同的组织而定,原则上是细胞密集的薄切,纤维多细胞稀的可稍为厚切,一般在5 ~10μm间。

4、调好防卷板。制作冰冻切片,关键在于防卷板的调节上,这就要求操作者要细心,准确地将其调较好,调校至适当的位置。切片时,以切出完整、平滑的切片为准。切好的组织在干净的玻片上黏附时顺着一个方向稍微用力轻轻一带 ,可避免组织摊片过程中皱折 ,保证组织结构的完整及切片的美观。

注:①包埋剂的选用:包埋剂是对冷冻切片质量一重要影响因素,包埋剂用量要适宜,过多或过少都会影响标本冷冻质量。常用的有三种包埋剂OCT剂、B超藕合剂以及普通胶水。B超藕合剂适用于细胞丰富质地较嫩的组织,普通胶水或 OCT剂适用于纤维丰富质地偏硬组织。(OCT包埋剂骤冷时固化,其冷冻速度和软硬韧度与组织相近,其还具有水溶性,不影响染色等优点。)

②组织块过小:先将少量胶挤在托架上预先放在冰冻机中冷冻,约30秒钟左右待胶凝固时将小组织放上,组织周围再加一些胶,再次置于冷冻机中冷冻,这样组织被垫高,就能快速切出高质量的切片。

③冷冻箱及冷冻头的温度高低,要根据不同的组织而定。温度过低会导致组织块过硬,切片碎裂,出现梯田状薄厚不均或空洞;反之,温度过高,组织块硬度不够 ,切片不易成形或成皱褶。数据图1供参考。

④当切片时,如果发现冰冻过度时,可将冰冻的组织连同支承器取出来,在室温停留片刻,再行切片,或者用口中哈气,或者用大拇指按压组织块,以此来软化组织,再行切片。另者,调高冰冻点。

⑤用于附贴切片的载玻片,不能存放于冷冻处,于室温存放即可。因为当附贴切片时,从室温中取出的载玻片与冷冻箱中的切片有一种温度差,当温度较高的载玻片附贴上温度较低的切片时,由于两种物质间温度的差别,当它们碰撞在一起时,分子彼此间发生转移而产生了一种吸附力,使切片与载玻片牢固地附贴在一起。如果使用冷藏的载玻片来附贴切片,由于温度相同,没有发生上述的现象。


上海通蔚生物科技有限公司以质量求生存,细胞系以信誉求发展的精神,精益求精,力求做到更好,不管是过去还是现在和将来,全体员工将再接再厉,以优质的服务态度,全新的精神面貌,为广大新老客户,提供优质的产品和售后服务,让我们携手共创美好未来!

上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山区枫泾镇环东一路65弄2号3463室

主营产品:ELISA检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,鸭ELISA试剂盒

©2019 版权所有:上海通蔚生物科技有限公司  备案号:沪ICP备14033764号-3  总访问量:848320  站点地图  技术支持:环保在线  管理登陆

QQ在线客服
联系方式

15800441009

4008723722

扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站