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介绍胰岛素ELISA试剂盒及操作注意事项
更新时间:2023-03-07   点击次数:678次

胰岛素ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被胰岛素(INS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

  

什么是胰岛素?

胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内降低血糖的激素,同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。外源性胰岛素主要用来治疗糖尿病。


胰岛素的生物合成速度受血浆葡萄糖浓度的影响,当血糖浓度升高时,β细胞中胰岛素原含量增加,胰岛素合成加速。


胰岛素在胰岛β细胞中合成。胰岛素的分子量5700,由两条氨基酸肽链组成。A链有21个氨基酸,B链有30个氨基酸。A-B链之间有两处二硫键相连。

  

胰岛素ELISA试剂盒操作注意事项:

1、试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶溶解后再使用。

2、实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3、浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;预处理后的样本无需稀释,直接取50μL加样即可。

4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5、所有液体组分使用前充分摇匀。

  

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