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大鼠elisa试剂盒采集及保存方法
更新时间:2023-05-21   点击次数:699次

用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、HRP标记的亲和素,经过洗涤后大鼠elisa试剂盒用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成。颜色的深浅和样品中的C3呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。


大鼠elisa试剂盒标本的采集及保存:

1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。


2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本大鼠elisa试剂盒采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。


3. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。


4.样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10,000倍。


注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。


ELISA试剂盒操作注意事项:

1、试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。


2、实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。


3、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。


4、使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。


5、使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。


6、洗涤酶标板时应充分大鼠elisa试剂盒拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。


7、底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。


8、加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。


9、按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作


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