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​ 通蔚生物实验室中细胞划痕实验常见的问题解答
更新时间:2024-01-18   点击次数:427次

细胞划痕实验是观察掌握细胞迁移实验过程中细胞活动的重要实验方法

问题一:细胞划痕实验为什么这么重要

答:因为细胞划痕实验是观察细胞迁移活动的重要技术手段,而且简单快捷、经济实惠(划重点)。


问题二:细胞划痕实验为什么一般选择6孔板

答:因为6孔板大小适中,可保证有相当距离的平直划痕,便于观察;当然若是需要高通量初筛时,也可以用12或者24孔板。


问题三:为什么细胞接种密度要求过夜100%融合

答:如果过夜后细胞=没有100%融合,虽然可以适当延长培养时间,但因细胞密度已经很大,所以细胞状态会逐渐变差,后续细胞可能不迁移而是凋亡。


问题四:怎样避免细胞增殖对细胞迁移实验造成的假阳性结果

答:操作如下:

1、使用无血清或低血清培养基(<2%)可降低细胞增殖对实验结果的影响

2、一般认为24h为细胞的一个周期,在选取合适的时间点(6,12,24h)检测划痕宽度时,不要超过细胞一个周期的时间。


问题五:结果怎样拍照

答:按照6孔板背后画线的垂直方向划痕,可以形成若干交叉点,划痕一次与5条定位线相交,就有10个可固定监测点,以解决了前后观察时位置不固定的问题。


问题六:细胞不迁移怎么回事

答:避开细胞状态的影响,需要考虑细胞自身的迁移能力,并非所有细胞都适合划痕实验。


问题七:结果统计中,细胞计数和统计面积那个好用

答:根据细胞划痕实验的实验结果选择。如果细胞迁移轮廊比较清晰,并且迁移数量不多,我们可以选择细胞计数;但如果细胞数比较多,连片生长,那么统计面积比细胞计数的方式更简便且客观。


问题八:细胞划痕技术有什么不足吗

答:细胞划痕实验的不足主要包括:

1、适用的细胞类型范围小,一是需要迁移强的细胞,而且对无血清的环境有较强的忍受力(至少24h)12h细胞凋广就超过50%。

2、自身操作的实验误差,如划痕距离不一致等。


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