技术文章您现在的位置:首页 > 技术文章 > 上海通蔚生物告诉你ELISA四大常用方法优缺点
上海通蔚生物告诉你ELISA四大常用方法优缺点
更新时间:2024-06-12   点击次数:472次
  相信经常用elisa试剂盒做实验的人都知道,有四种常用的方法来检测,他们分别是直接法、间接法、双抗体夹心法和竞争法。今天给大家分享下他们的优点和缺点。
 
  1.间接法(indirect ELISA)
 
  此测定方法与直接法类似,差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
 
  优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它*多的免疫反应性。
 
  缺点:交互反应发生的机率较高。
 
  2.双抗体夹心法(sandwich ELISA)
 
  被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。
 
  优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
 
  缺点:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
 
  3.直接法(direct ELISA)
 
  将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
 
  优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
 
  缺点:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
 
  4.竞争法(competitive ELISA)
 
  样本里的抗原(自由抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一起竞争相同的抗体,当样品里的自由抗原越多,就可以结合越多的抗体,而固定抗原就只能结合到较少的抗体,反之亦然。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只有固定抗原的对照组结果相比较,根据呈色差异就可计算出样品里的抗原含量。
 
  优势:可适用比较不纯的样本,而且数据再现性很高。
 
  缺点:整体的敏感性和专一性都较差。
上海通蔚生物科技有限公司

上海通蔚生物科技有限公司

地址:上海市金山区枫泾镇环东一路65弄2号3463室

主营产品:ELISA检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,鸭ELISA试剂盒

©2019 版权所有:上海通蔚生物科技有限公司  备案号:沪ICP备14033764号-3  总访问量:995949  站点地图  技术支持:环保在线  管理登陆