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ELISA试剂盒样本处理及要求
更新时间:2013-07-26   点击次数:1488次

ELISA试剂盒样本处理及要求
1. 血清:室温血液自然凝固 10-20 分钟,离心 20分钟左右(2000-3000 转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 
2. 血浆:应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合 10-20 分钟后,离心
20 分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 
3. 尿液:用无菌管收集,离心 20 分钟左右(2000-3000 转/分) 。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心 20 分钟左右(2000-3000 转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用 PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度
达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右
(2000-3000转/分)。仔细收集上清。ELISA试剂盒保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持 2-8℃的温度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或匀浆器将标
本匀浆充分。离心 20 分钟左右(2000-3000转/分) 。仔细收集上清。分装后一份待检测,其
余冷冻备用。 
注意事项: 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 
2.ELISA试剂盒不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

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