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FAME全自动酶免分析对人ELISA试剂盒检测系统因素分析
更新时间:2013-10-28   点击次数:1233次

        在全自动加样仪的加样高度设置中,不断增加加样高度,观察FAME对4个质控血清平行孑L的检测效果。加样高度设置对检测结果的影响:在AT plus 2容器参数编纂过程中,丈量酶标板的孔径和高度,并进行加样定位,确保12根一次性加样针均在对应微孔的中心。因此,有必要对FAME洗液桶进行适当的水浴预温,使洗液温度达到18℃后再用于检测,人ELISA试剂盒对保证FAME检测结果的正确性起重要作用。但经进一步研究后发现,洗液在较低温度下(小于14℃),FAME的洗板*减弱,阴性样本的检测曲线变宽,严峻脂血样本可能会泛起假阳性。观察检测结果是否有假阴性及原始OD值的变异系数(CV)。在不同温度的FAME洗液下,对88份正常的无偿献血者血样进行4个项目检测,观察不同温度的洗液对检测结果的影响。样本选用88份正常的*抗凝的无偿献血者血样,为降低因试剂造成的误差,4个项目在不同洗液温度下的检测均采用统一批号的试剂,于2周内完成。

        样本抗凝方法对检测结果的影响:将88份无偿献血者血样随机分为两组,对照组和实验组各44份,对照组血样(m1)和肝素(u)的比例为1:10,实验组血样(m1)和肝素(U)的比例为1:2.室温下,两组血样经3 000 r/min离心5 min后均有较好的分层,血浆呈液态,肉眼观察两组血样无区别。近年来,良多采供血机构接踵引进了全自动酶免分析系统用于酶联免疫吸附试验(ELISA试剂盒)检测,全自动酶免检测设备在过程处理的速度、正确性精密度和重复性方面均优于手工操纵。分别在HBsAg、抗一HCV、抗一HIV和TP等4项ELISA检测项目的酶标板上设空缺对照2孔、阴性对照3孔、阳性对照2孑L、质控1孔,其余88孔用于两组血样的检测。方法随机选择对照组和实验组各44份无偿献血者血样,分别进行两种不同方式的抗凝,应用FAME全自动酶免分析系统进行HBsAg、抗一HCV、抗一HIV、TP 4个项目检测,比较两组检测结果。
        在严寒的冬季,当实验室温度低于14℃时,即使采取了升温措施,使实验室温度很快达到预定的室温,但洗液温度的上升会存在严峻的滞后现象。洗液温度对检测结果的影响:用10℃蒸馏水对浓缩洗涤液进行20倍稀释,充分混匀,待*溶解后加入FAME洗液桶,人ELISA试剂盒并用37℃水浴箱分别对其水浴加热至14℃、18℃、22℃ 、26℃后用于检测。探讨3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素,进步ELISA试剂盒检测结果的正确性。在加样程序编纂中,加样步骤及加样体积按试剂仿单要求进行,加样高度在软件缺省值(8.1 mm)的基础上分别增加0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mm。

            恰当的洗涤液温度对保证FAME的洗板效果及检测结果的重复性有重要意义。在无偿献血者标本中,经常会有较多的不同程度的脂血样本,一般以为溶血、脂血样本对ELISA 检测结果影响不大L3 。若检测结果为阳性,重新取样后用相同试剂双孔复测,人ELISA试剂盒若双孔均为阴性,则确定原检测结果为假阳性。检测样本用4个室内质控血清替换,各项试验平行检测2孔,对照用手工加样,保证CUT OFF值计算正确。

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