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评价ELISA试剂盒的方法
更新时间:2013-12-18   点击次数:1193次

    ELISA试剂盒具有许多优良特性。尽管有些处理需要*化条件,但只要按要求去做,就十分简单明了,并容易掌握。尤其是该方法不需要花费大量的时间作野外观察,ELISA试剂盒供试所采集的材料可收集起来并存一段时间,特别适用于一些只取食汁液而不取食猎物硬壳的捕食者胃内含物分析,因为猎物的坚硬部分没有留在捕食者消化道或排泄物内。同时,高灵敏度、特异性、可重复性以及每次可处理大量材料使得该检测法或得了满意的效果。这是一般的血清学方法不能比拟的。该方法的一个缺点是在阴性反应中总有一定的颜色产生,必须要有一个标准来确定阳性反应的临界点。

    目前,除继续推广ELISA试剂盒在捕食作用研究中的应用及发展更为有效的方法外,还有两个问题需进一步研究。一是环境因子,ELISA试剂盒尤其是温度对猎物在捕食者胃内残存时间的影响,目前的研究还无法考虑不同温度下消化速率的差异。二是需要对实验室或得的数据与田间的进行比较分析,并对阳性反应率进行校正。这些问题的研究将有助于定量评价捕食作用。

     捕食作用的定量评价

   捕食作用的定量评价是昆虫生态学家所希望解决的课题之一,但对生活在自然界的捕食者来说,其捕食作用受到各种环境因子的影响,它每次的捕食量和捕食后的消化速率是未知的。因此,要对捕食作用进行定量分析就存在很大困难。然而,如果消化的时间和每次取食的量通过实验研究确定的话,则对捕食数量进行估计是可能的。尤其是ELISA的应用,为实现这种可能提供了保证。SOpp等对已有的工作进行了总结,并提出了一种改进的定量评价。张文庆等也提出了功能反应-血清法来定量评价捕食作用。迄今为止,定量评价的公式5能较好地拟合实验结果。而公式2的拟合效果zui差。但根据公式要得到准确的定量评价结果仍是困难的。
 

ELISA试剂盒性能:
1. 灵敏度:zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。

ELISA试剂盒结果判断与分析:
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值。
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的8-OHdG标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的8-OHdG含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
3、检测值范围:0-80nmol/L。
4、敏感度: 0.1 nmol/L。

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