1. 取出细胞爬片,迅速置入冷丙酮固定 20~30 分钟。
2. 蒸馏水浸泡 5 分钟,2 次。
3. 打孔液浸泡 5 分钟。
4. 蒸馏水浸泡 5 分钟,2 次。
注:第 3、4 步仅用于检测细胞内抗原,检测细胞膜抗原时不用。
5. 正常血清封闭:从染片缸中取出切片,ELISA试剂盒擦净切片背面水分及切片正面组织周围的水分 (保持组织呈湿润状态,)滴加正常山羊或兔血清 (与第二抗 体 同源动物血清)处理,37℃,15 分钟。
附:正常血清配制 ( 或按试剂盒规定的浓度配制):按 1:20比例,用 PBS 配制,每张切片需要量按 50μ+5μl (10%抛洒量) 计算。
6. 滴加*抗体:用滤纸吸去血清,不洗,直接滴加*抗体,37℃ 2 小时(也可置于 4℃冰箱过夜) 。
7. PBS:5 分钟,2 次(置于摇床) 。
8. 滴加生物素化的二抗,37℃,40 分钟。
9. PBS:5 分钟,2 次(置于摇床) 。
10. 滴加三抗 (SAB 复合物) ,37℃,40 分钟。
11. PBS:5 分钟,2 次(置于摇床) 。
12. DAB 显色,镜下观察,ELISA试剂盒适时终止(自来水冲终止) 。
附:DAB 的配制① 储备液(DAB 25mg/ml)的配制:DAB 250mg + PBS 10ml,待*溶解后分装成 1ml,100μl,50μl ,20μl 等,-20℃,冻存。② 工作液:DAB 储备液 20μl + PBS 1000μl + 3% H2O2 5μl
13. 自来水(细水)充分冲洗。
14. 苏木素复染,室温,30 秒,自来水冲洗。
15. 自来水冲洗返蓝,15 分钟。
16. 梯度酒精脱水:80%,2 分钟 95%,2 分钟 100%,2 次,5 分钟。
17. 二甲苯透明:I ,II (二甲苯)各 5 分钟
18. 封片:加拿大树胶(或中性树胶)封片。
XR-E-123161 血小板生成素(TPO)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO) ,适用种属: Homo sapiens (Human) ,规格: 48T/96T
XR-E-123162 肿瘤坏死因子β(TNFβ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb) ,适用种属: Mus musculus (Mouse) ,规格: 48T/96T
XR-E-123163 肿瘤坏死因子β(TNFβ)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb) ,适用种属: Homo sapiens (Human) ,规格: 48T/96T
XR-E-123164 肿瘤坏死因子α(TNFα)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) ,适用种属: Rattus norvegicus (Rat) ,规格: 48T/96T
XR-E-123165 肿瘤坏死因子α(TNFα)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) ,适用种属: Mus musculus (Mouse) ,规格: 48T/96T
XR-E-123166 肿瘤坏死因子α(TNFα)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha (TNFa) ,适用种属: Homo sapiens (Human) ,规格: 48T/96T
XR-E-123167 组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tissue InhibitorsELISA试剂盒 Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) ,适用种属: Homo sapiens (Human) ,规格: 48T/96T
XR-E-123168 组织金属蛋白酶抑制因子3(TIMP3)酶联免疫吸附测定试剂盒 ,英文名: ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) ,适用种属: Homo sapiens (Human) ,规格: 48T/96T