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人ELISA试剂盒的相应的解决办法
发布时间:2015-07-10   点击次数:477次

    人ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,人ELISA试剂盒有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。

 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。

 2 加样 可能原因:

 1)血清或血浆标本分离不好即进行加样;

 2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时);

 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。

 解决办法:

 1)标本为血清:zui好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,人ELISA试剂盒采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。

 2)加样后及时放入孵箱。

 3)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

 4) 如果采用AT或其他全自动加样,zui好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

 5) 标本较多时,请分批操作。

 3 孵育 可能原因:

 1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底;

 2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 

解决办法:

 1) 贴封片或加盖;

 2) 按说明步骤严格控制操作时间。

4 洗板 可能原因:

 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。

 2) 采用半自动洗板机洗板时,人ELISA试剂盒洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。

 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 

上海通蔚生物科技有限公司

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主营产品:ELISA检测试剂盒,ELISA试剂盒,酶联免疫试剂盒,人ELISA试剂盒,大鼠ELISA试剂盒,小鼠ELISA试剂盒,豚鼠ELISA试剂盒,兔ELISA试剂盒,羊ELISA试剂盒,牛ELISA试剂盒,鸡ELISA试剂盒,鸭ELISA试剂盒

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