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ELISA试剂盒终止液后应立即测定结果
更新时间:2016-03-21   点击次数:2235次

    你可别以为对人体微生物的研究仅仅停留在实验室阶段,实际上有的产品已经上临床了,有的产品已经获FDA批准了,有的公司甚至已经IPO了。你看,他们来了!ELISA试剂盒使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,ELISA试剂盒能使用复孔的尽量做复孔。
    加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
    甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。ELISA试剂盒如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,ELISA试剂盒轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入ELISA试剂盒终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。 

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