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ELISA试剂盒即免疫吸附剂
发布时间:2016-07-27   点击次数:509次

       今天我们就谈ELISA试剂盒中阴性本底的形成原因。酶联固相免疫实验中,尤其在简介ELISA试剂盒法中,经常会碰到阴性本底的问题。主要是本底过高和不同标本的本底值差异较大。本底或称背景,是ELISA试剂盒中的非特异性显色。底物未经过酶作用而呈现的颜色称为空白。底物液如配制不当会出现一定的空白值。这个空白值只要不太高(A<0.05),可从个测定值中减除,并不影响实验结果。这里研究的是不含待测抗原或抗体的阴性标本在ELISA试剂盒中出现的本底。从理论上讲,只有阳性标本zui终才能引出显色反应,在以下情况

    因此除在包被时有目的地使抗原或抗体吸附在载体上,在ELISA试剂盒各个步骤中均有可能发生干扰物质的吸附,使zui终产生与受检抗原-抗体反应无关的显色,这是形成本底的主要原因。

        在酶免疫测定中,ELISA试剂盒的特点是利用固相载体作为分离游离和结合的酶结合物的手段。固相载体与吸附在其上的抗原会抗体形成固相抗原或固相抗体,即免疫吸附剂。通常所用的固相载体聚苯乙烯其表面主要是疏水基团,通过疏水键与蛋白质结合。之中吸附式物理性的非特异性吸附,虽然蛋白质的分子量、等电点、浓度等对吸附的量有一定的影响,但总的来说各种蛋白质均能吸附在聚苯乙烯载体的表面。因此需要更加专业的仪器。新BioCel装置可以将细胞均匀分装在多孔板中,ELISA试剂盒并执行一系列倒去孵育液,加入新鲜溶液的操作。许多中间过程,包括细胞培养基的倒去和吸光度的检测都可以自动进行。

        加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA试剂盒可用于测定抗原,也可用于测定抗体ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。

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