在ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶物，加底物。冻住血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，防止气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝结、缩短后即可获得。ELISA试剂盒也可在板孔中参加稀释液，然后在微型震动器上震动1分钟以确保混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超越一周测定的需低温冰存。
可用作ELISA试剂盒测定的标本非常广泛，体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、大便)等均可作标本以测定其间某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次实验不需用的有些应及时放回冰箱保留。在间接法ELISA试剂盒中可使本底加深。
本文将叙说ELISA试剂盒板式ELISA各个操作过程的留心关键，珠式、管式及磁性球ELSIA，国外试剂均与特别仪器合作应用，严厉遵循划定操作，必能得出准确的成果。ELISA试剂盒加样时应将所加物加在ELISA试剂盒板孔的底部，防止加在孔壁上部，并留心不行溅起，不行产气愤泡。有此测定(如间接法ELISA)需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。
