ELISA这个方法的原理，大家都很明白，可真正用起来的时候，偶然间就会有点犯糊涂，怎样灵活应用ELISA这个检测方法以及怎样去挑选ELISA试剂盒。有些客户会用OVA（卵清卵白）做一些哮喘，过敏性肠炎的模型，然后会检测粘膜特异性的sIgA以及血清内里IgG，IgE等指标。
 

ELISA检测方法简单，灵敏度高，为ELISA检测血清或者培养上清的细胞因子、胰岛素、激素等排泄型的小分子卵白的定量检测；病原体抗原的定性与定量；评估自己制备的血清抗体的效价等。很多客户有个误区，拿来一个指标就想当然地尝试用ELISA去检测，我还是建议多动脑，该检测活性的检测活性。

对付一些小分子的检测，例如：前线腺素、糖皮质激素的检测，我的理解是要用竞争法ELISA去检测，也要购买采用这个方法的盒试剂盒。ELISA试剂盒一般细胞因子的检测，都是采用常规的夹心法ELISA检测，由于因子分子量比力大，一般10几个KD左右，很容易找到两个或多个抗原表位。

小分子很难找到两个不通的表位，也就决定了包被抗体和检测抗体无法同时结合小分子并固相化。解决方案便是酶标板上包被二抗，每个孔加入一定量的酶标的小分子，然后加样品，再加不带标志的检测抗体，显色底物。样品的目标小分子的含量越高，吸光度越低。