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ELISA试剂盒如何分析的检测结果
更新时间:2018-11-23   点击次数:3228次

细节决定成败,这对于试验室科研工作者来说也是如此。在ELISA试剂盒试验中的各项操作细节有很多,如尽量少用排枪、勤换枪头,加样时由低浓度向高浓度加,因为这样可以削减跳孔的几率。而整个试验的*后关键就是结果的处理办法了,那么在在今日的技术文章中,上海通蔚生物试验为您带来的是ELISA试剂盒检测结果剖析办法。
①:ELISA试验中样品都要做复孔或三孔,然后核算每个浓度规范品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。
②:平均OD值减去空白孔的OD值。
③:制造规范曲线。
 以减去本底后的OD值为X轴,规范品的浓度为Y轴,运用作图软件得出一个合适的核算办法。主张运用合适的软件来作图,比方CurveExpert 1.4。这款软件可以给出很多种办法(比方直线、半对数、对数、四参数方程等)并从中选择一条*合适的方程。要想查验某条曲线是否与表中数据吻合,可以将规范品的浓度作为未知数,将对应的OD值带入该方程,核算出规范品的浓度,得到的结果应该与实践浓度很接近(+/-10%)。选择拟合度*的那条曲线。
 如果出现规范曲线的线性欠好,或平行性欠好(双孔对照孔的OD值不同很大),或出现跳孔的现象,可能引起的原因有酶标板孔间相互污染、洗板后未能尽快进行下一步操作、添加样品或其它试剂时操作的办法不对、孵育位置避光性欠安或盖板膜没有密封好使得水分蒸腾、酶标板孔问参加的试剂量不同,相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中,人工洗板时也请当心,勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、添加试剂时请悬空滴入,切记勿将枪头接触到板孔内,吸取不同试剂瓶中的液体时就要替换一次枪头、确认孵育环境不透光,盖板膜将酶标板密封好、运用已校正过的微量加样器,如将*次参加液体时枪头上留有一滴的液体滴下,那么将今后枪头上留有的液体也滴下,以确保参加液体体积的共同性。
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