影响反响要素较多，特别是固相载体的包被难达到各个体之间的共同，因此在定量测定中，每批测验均须用一系列不同浓度的参考规范品在相同的条件下制造规范曲线。以下就是上海通蔚生物的详解：
测 定大分子量物质的夹心法ELISA试剂盒，规范曲线的范围一般较宽，曲线点的吸光度可接近2.0，绘制时常用半对数纸，以检测物的浓度为横坐标，以吸 光度为纵坐标，将各浓度的值逐点连接，所得曲线一般呈S形，其头、尾部曲线趋于平整，中央较呈直线的部分是理想的检测区域。在实验条件(包含试剂)较难 保证恒定的情况下，这种判别法较为合适。

在得出标本(S)和阴性对照(N)的A值后，核算S/N值。也有写作P/N的，这里的P不代表阳 性ELISA试剂盒(positive)，而是患者(patient)的缩写，不应误解。为避免混杂，更宜用S/N表明。在前期的间接法ELISA中，有 些作者定出S/N为阳性规范，现多为各种测定所沿袭。实际上每一测定体系应该用实验求出各自的S/N的阈值。更应留意的是，N所代表的阴性对照是不含受检 物质的人血清。

有的ELISA试剂盒中所设阴性对照为不含蛋白质或蛋白质含量较底的缓冲液，致使反响后产生的本底可能较正常人血清的本底 低得多。定性测定的结果判别是对受检标本中是否含有待测抗原或抗 出"有"或"无"的简单回答，分别用"阳性"、"阴性"表明。"阳性"表明该标本在该测定体系中有反响。"阴性"则为无反响。用定性判别法也可得到半定量 结果，即用滴度来表明反响的强度，其实质仍是一个定性实验。在这种半定量测定中，将标本作一系列稀释后进行实验，呈阳性反响的稀释度即为滴度。依据滴 度的凹凸，能够判别标本反响性的强弱，这比观察不稀释标本呈色的深浅判别为强阳性、弱阳性更具定量意义。 在间接法和夹心法ELISA试剂盒中，阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA试剂盒中则相反，阴性孔呈色深于阳性孔。两类反响的结果判别方法不同，分 述于下。