为了得到更好的实验成果,一些ELISA试剂盒实验新手们还需多加了解技术内容,公司每周都会为您精心整理出要点技术方法,能够熟练的把握好这些之后再应用到实验里面就会简略的多.今日的主要内容是入了ELISA的门,这些技术点你得知道.

样本加样方法

1 .细胞上清：前处理有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假设浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释.

2 .脑脊液：前处理有必要是细胞离心去除,每孔直接加100μl即可.假设浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释.
3 .血清血浆：请参与50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,如稀释量大,请将样本与样本剖析缓冲液等量参与,缺乏部分用标准品稀释液弥补至100ul.

A.血清标本应是自然凝结后,取上清,ELISA试剂盒避免在冰箱中凝结血液；

B.血浆标本,举荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于－20℃,避免重复冻融.

C.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂；

D.标本应明澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除.

E.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则成果将不准确.

4 组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中参与蛋白酶抑制剂,避免蛋白成份被内源性蛋白酶降解,构成检测成果的值偏低.

因组织匀浆液的样本蛋白品种多,含量丰厚,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验成果.具体是参与50ul样本剖析缓冲液后加50ul标本,需稀释时,ELISA试剂盒请将样本与样本剖析缓冲液等量参与,缺乏部分用标准品稀释液弥补至100ul.

由于政策蛋白不同,或许构成降解的蛋白类型或许不一样,假设实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性参与,可节约抑制剂.假设查不到相关文献,可采用组合抑制的方法确保蛋白不易被降解.