预期应用
ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关生物液体中血管紧张素转化酶(ACE)含量。
实验原理
用纯化的ACE抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加进标本或标准品、生物素化的ACE抗体、HRP标记的亲和素,经过*洗涤后用底物(TMB)显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成*的。颜色的深浅和样品中的ACE呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(
试剂盒组成及试剂配制
1、 酶标板:一块(96孔)
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
6、 检测溶液A:1×120
7、 检测溶液B:1×120
8、 底物溶液:1×10ml/瓶。
9、 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液:1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。
11、覆膜:5张
12、使用说明书:1份
操纵步骤
实验开始前,各试剂均应平衡至室温,试剂不能直接在37
1、 加样:分别设空缺孔、标准孔、待测样品孔。空缺孔加样品稀释液 100
性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃往液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100
3、 弃往孔内液体,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分钟,大约400
4、 每孔加检测溶液B工作液(临用前配制)100
5、 弃往孔内液体,甩干,洗板5次,方法同步骤3。
6、 每孔加底物溶液90
7、 每孔加终止溶液50
8、 立即用酶标仪在450nm波长丈量各孔的光密度(
1、 由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,
本产品可能存在一定的质量技术风险。
2、 *的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操纵以及当时的实验环境密切相关,请务必
预备充足的标本备份。
3、 在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的 污染,由于蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
4、 试剂盒保存:请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20
5、 浓洗涤液会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
6、 刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
7、 有效期:6个月。
8、 本操纵说明适用于48T试剂盒,但48T试剂盒所有试剂减半。