细胞活化︰ 

1.收到细胞株包裹时，请检查细胞株冷冻管是否有冻结情形，若有请当即告诉。细胞株请尽速开始培育，或当即冷冻保存(置于–70 °C，隔夜后，移到liq N2)。 

冷冻细胞冻结程序: 

1. 根据细胞株数据单zhi定之基础培育基种类、血清种类和其它zhi定之成份和份额，制备培育基。绝大多数之细胞均无法当即适应不同之基础培育基或不同之血清种类，若因试验需要，有必要有所不同时，必须以缓慢份额渐次改变培育基组成，确定细胞适应后，方进行所需之试验。 

2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 马血清)，对细胞而言差异极大，请必须根据细胞株资料单zhi定之血清种类培育之。 

3. 将培育基置于37 °C 水槽中回温，回温后喷以70 % 酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，当即放入37 °C 水槽中快速冻结，水面高度不行接近或高过冷冻管之盖沿，否则易产生污染。轻摇冷冻管使其在1 分钟内悉数融化后，以70%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台。

4. 根据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取10 ml培育基加至T25 或T75 flask中。取出已冻结之细胞悬浮液，慢慢参加T25或T75 flask 内之培育基，混合均匀，放入37 °C，5 % CO2培育箱培育。 

5. 对绝大多数细胞而言，1 % 以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需马上由冻结.细胞中去除，待第二天确定细胞成长或贴附良好后再去除即可。

 惟对极少数因对DMSO 灵敏或会形成细胞分化之细胞，需当即去除DMSO 者，则可将冻结后之细胞悬浮液放入5 - 10 ml 培育基中，离心300 xg (约1000 rpm)，5 分钟，小心移去上清液，参加适量新鲜培育基，将细胞均匀混合后，转移至培育瓶中，再放入37 °C，5 % CO2 培育箱培育。

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