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酶联免疫试剂盒的基本原理有三条
发布时间:2021-12-24   点击次数:125次
   酶联免疫试剂盒的免疫分析是一种利用特定抗体与抗原或半抗原发生的高选择性高特异性识别和结合原理,对待测抗体或者抗原进行分析测定的方法,酶联免疫吸附分析是免疫分析的一种,分三个部分组成:免疫识别,信号输出和数据处理。
  
  步骤:免疫识别是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗体,而后利用抗体识别待测的抗原(通常是疾病的蛋白质生物标记物,病毒,细菌等等,从复杂待测液中将抗原吸附到96孔板表面。接着用带有辣根过氧化酶(HorseradishPeroxidase,HRP)、荧光或放射性标记的抗体通过直接或者间接的方式输出识别信号。最后利用信号强度,标准样品浓度梯度等信息计算得出待测样中目标抗原的浓度。
  
  酶联免疫试剂盒的基本原理有三条:
  (1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
  (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
  (3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
  
  由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。
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