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溶血对ELISA试剂盒检测乙肝表面抗原影响的因素
更新时间:2014-07-24   点击次数:989次

    在临床检测中,常常遇到溶血的标本。溶血对ELISA检测乙肝表面抗原(HBsAg)究竟是否有影响,ELISA试剂盒我公司研究技术人员对标本溶血的原因及其对ELISA检测乙肝表面抗原的影响进行简要的讨论,随着生命科学的发展,我公司将以全新的姿态展现在生物科技的行业中,公司将不断加快产品的创新性,大力提高生物试剂的研发和销售。

1 标本溶血的原因

    溶血可分为体内溶血和体外溶血。体外溶血可由物理因素(抽血时负压过大、水浴温渡过高、冰冻、振荡等机械性破坏)、化学因素(血样接触表面活性剂)和代谢因素(如遗传病引起红细胞脆性增加)引起。在临床上常见的引起标本溶血的原因包括:因为病人严峻脱水、低血容量休克等原因导致穿刺难题造成的溶血;因为抽血用具质量分歧格如真空管负压不够或塑料试管质量较差导致的溶血;用干燥管采血为了尽快分离血清用竹签搅拌不当引起的溶血等。体内溶血可由物理因素(如人工心脏瓣膜或大血管手术后)、化学因素(如恶性疟)和药物毒性反应等因素引起。 

2 标本溶血对乙肝表面抗原检测的影响

    在17例溶血标本中,初检的5例HBsAg阳性标本,经重新抽血复检后有2例仍为阳性,另3例转阴。20例HBsAg阴性和10例OD值在临界值四周的样本,溶血与对应非溶血标本OD值间差异没有明显性:10例HBsAg阳性样品,溶血标本OD值显著大于对应非溶血标本OD值。ELISA试剂盒以为是溶血导致了假阳性的泛起。对20例HBsAg阴性和10例HBsAg阳性病人的溶血和非溶血标本包括10例OD值在临界值四周的标本进行了对照,结果非溶血和溶血标本的阴、阳性结果*一致。 


    一些研究没有发现标本溶血对HBsAg检测的影响。对HBˉsAg强阳性样品的非溶血与溶血(Hb浓度为241g/L)标本的A值作了对照后未发现两者有统计学差异,得出结论:溶血对HBsAg的检测没有影响(严格意义上应表述为:溶血对HBsAg强阳性标本的检测没有影响)。

3 标本溶血对乙肝表面抗原检测影响的可能机制

    溶血对ELISA试剂盒的影响主要是反应孔对溶血血清中Hb的非特异性吸附和溶血时细胞内液对血清的稀释作用,溶血是因为各种原因造成红细胞破坏,胞内血红蛋白(Hb)等物质和细胞内液进入血清。Hb具有类过氧化物酶活性,其作用与辣根过氧化物酶类似,假如反应孔非特异吸附Hb而残留,则可催化底物显色,使本底A值升高甚至造成假阳性。ELISA试剂盒总之,溶血对ELISA检测HBsAg有一定的影响,影响的性质及其大小因所使用的试剂、测定方法、标本HBsAg的有无及浓度高低、洗板的质量好坏而异。 

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