ELISA试剂盒能够简略、地从琼脂糖凝胶上纯化收回DNA段,一起除掉蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可收回100bp–40 kb DNA段,可纯化高达10μg的DNA段,收回率可达80%以上(<100bp或>10kb的DNA段收回率为30–50%)。运用ELISA试剂盒收回的DNA可适用于各种惯例操作,包含酶切、PCR、测序、文库筛选、衔接和转化等各种分子生物学试验。
ELISA试剂盒注意事项:
1、 不一样厂家出产的试剂盒因出产工艺和操作方法略有不一样,必须依照所用试剂盒严厉操作,不然简单发生检查成果的不确定性.
2、 若不一样批号试剂的不一样组分(A液或酶工作液),或不一样
试剂的不一样组分进行穿插运用,有也许呈现显色浅或本底高,花板等情形。
3、 加样时样品量差错,关于阴或很阳的标本影响不大,但对阈值邻近的标本影响极大,建议校正加样器。
4、 反应时间的差错,做很多标本时,孔和zui后一孔以及一些特别标本也许影响较大。
5、 由于滴瓶的精密性必定不如加样器,不扫除不一样滴头滴量的差错。别的滴加过程中是不是发生气泡、速度是不是均匀,是不是颤抖等影响液量的要素均可致使以上情况。高标准请求时应运用加样器。
6、 阈值邻近实践上是个灰区(gray scale),不能截然分为阴性、阳性,国外厂家均请求对这有些可疑标本进行奇数次复检,以次数多者为准,如一次阳两次阴zui后判为阴,但实践上是不是为阴不好说,只要判为可疑,上能够让病人过一段时间后再测。
7、 肉眼观察稍显色,酶标仪打印为阴性的标本在实践工作中是难以避免的,肉眼目测成果不可靠,应以酶标仪判读为准。
8、 ELISA试剂盒由阴性变为强阳性因素多为操作过程中漏加试剂等有关。
9、 临界值邻近标本动摇为正常现象,任何试剂均不可避免。能够思考将标本做奇数次复检。