实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中牛结核病抗体(TB-Ab)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中结核病抗体(TB-Ab)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中牛结核病抗体(TB-Ab)的存在与否。
试剂盒组成
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 阳性对照 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 阴性对照 0.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
计算和结果判定
试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为牛结核病抗体(TB-Ab)阴性
阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为牛结核病抗体(TB-Ab)阳性
注意事项
操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用,试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存,浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,底物请避光保存,试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理,终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。