ELISA试剂盒是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
ELISA试剂盒组成
1. 微孔板 (固相抗体) 96 well
2. 标记抗体 (30倍浓缩,HRP标记抗体) 0.4 ml
3. 标准品 0.5 ml × 2
4. EIA缓冲液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 30 ml
5. 标记抗体稀释液 (1% BSA, 0.05% Tween-20 含有PBS) 12 ml
6. 显色液 (TMB底物液) 15 ml
7. 终止液 (1N硫酸) 12 ml
8. 洗涤缓冲浓缩液 (40倍浓缩,0.05% Tween-20的磷酸缓冲液) 50 ml
ELISA试剂盒检测范围和保存条件及有效期
1. 试剂盒保存:2-8℃;
2.有效期:6个月。
ELISA试剂盒注意
1. 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。