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小鼠Elisa试剂盒实验注意事项
更新时间:2024-06-26   点击次数:360次
  小鼠ELISA试剂盒样本前处理是酶联免疫试验中关键的一步,稍有不慎将导致实验满盘皆输,如何安全,快捷的处理样本,样本处理小鼠ELISA实验使用注意事项及试验操作关键希望能帮助大家。 小鼠ELISA试剂盒使用方法:
 
  1、血清:操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血红细胞迅速小心地分离。
 
  2、血浆:EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
 
  3、细胞上清液:1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
 
  4、组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液。
 
  5、保存:如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
 
  9、底物请避光保存。
 
  小鼠ELISA试剂盒实验操作注意要点:
 
  血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
 
  混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存按小鼠ELISA试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。
 
  对于科研人员来说小鼠ELISA试剂盒原理和操作步骤并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作过程中夹杂着洗涤和封闭步骤。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果操作不合理,也会很大程度上影响实验的准确度。实验结束时我们是否能获得有意义而且准确的信息,这在很大程度上取决于操作结果的正确与否。
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