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原代细胞的培育质量至关重要
更新时间:2021-01-25   点击次数:1606次

原代细胞是非常灵敏的细胞,需求传统培育基之外的额定养分物质。为了优化存活和成长,需求针对每种细胞类型选择特定的培育基。例如,内皮细胞对养分的需求与上皮细胞或神经元有很大区别,因而需求特制的内皮细胞培育基。而传统的细胞培育基依靠血清供给成长因子、激素、脂质和其他的未知组分,以支持细胞的成长。但对于原代细胞,高血清水平可导致细胞分化,或促进污染细胞如成纤维细胞的成长。

原代细胞的培育是指直接从机体取下细胞、安排和器官后立即进行培育。因而,较为严格地说是指成功传代之前的培育,此刻的细胞保持原有细胞的根本性质,如果是正常细胞,依然保存二倍体数。但实际上,一般把一代至第十代以内的培育细胞统称为原代细胞培育,是细胞培育中很重要的,其质量决定着传代细胞的质量,因而它的培育的质量至关重要。

 试验步骤:
 1.试剂耗材预备;
 2.取新鲜动物安排;
 3.酶消化;
 4.过滤网挑选、别离细胞;
 5.加培育液,37℃、5%CO2培育;
 6.传代;
 7.冻存;
 8.复苏。
 
应用:
1.为研究生物体细胞的成长、代谢、繁殖供给有力的手段;
2.为传代培育创造条件;
3.服务于仅供研究使用,

此外,增加血清也遭到成本上升及不同批次间差异性的困扰。配制具有很少或没有血清的特殊培育基则可以防止这些问题,并且愈加有利于促进特定类型细胞的成长。此外,其他一些实践,例如在更多的生理学相关底物上接种原代细胞而不是使用合成聚合物,可以明显的促进细胞贴壁、增殖及保持纯度。
 

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